青霉素V钾片主要适用于细菌引起的一些疾病，比如轻、中度的细菌感染，像扁桃体炎、咽喉炎、肺炎、中耳炎、鼻窦炎、皮肤软组织感染等。另外还可以预防风湿热的复发和感染性心内膜炎，还有螺旋体感染的治疗。这个药物其实也是青霉素类的抗生素，它的抗菌谱与作用机制氯青霉素是相同的，对多数的革兰阳性菌，还有一些个别的革兰阴性青霉素v钾片作用杆菌，比如流感嗜血杆菌还有螺旋青霉素v钾片作用体、放线菌，都具有抗菌的活性。但多数葡萄球菌包括金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性的葡萄球菌，因为可以产生β内酰胺酶使药物水解失活，所以对大多数的葡萄球菌是没有效果的。对大多数敏感菌株的活性可能较青霉素药弱2-5倍，对产青霉素酶的菌株也没有抗菌作用。