菟丝子提取物及其制备方法和菟丝子配方颗粒的制作方法

　　【专利摘要】本发明公开了一种菟丝子提取物及其制备方法和菟丝子配方颗粒，所述制备方法步骤如下：取菟丝子，加入用冰乙酸调节pH为3-4的水，再按菟丝子的质量，加0.5wt%-1.5wt%的纤维素酶和/或果胶酶进行酶解，水提，过滤，得滤液；将滤液减压浓缩至清膏，干燥，即可。本发明所述制备方法，经发明人的大量实验和研究，得出采用酶解技术破坏菟丝子种皮结构，降低菟丝子因加水后种皮表面产生的粘性，并确定了酶解和提取过程中的最佳参数，使得金丝桃苷和总黄酮的提取率得到显著提高菟丝子提取物，进而解决了菟丝子有效成分提取率偏低的问题。该方法简单易操作，且适合大规模生产。

　　【专利说明】菟丝子提取物及其制备方法和菟丝子配方颗粒

　　【技术领域】

　　[0001]本发明涉及中药领域，特别是涉及一种菟丝子提取物及其制备方法和菟丝子配方颗粒。

　　【背景技术】

　　[0002]英丝子为旋花科植物南方英丝子(Cuscuta australis R.Br.)或英丝子(Cuscutachinensis Lam.)的干燥成熟种子。性味辛、甘，平。归肝、肾、脾经。具有补益肝肾，固精缩尿，安胎，明目，止泻的功效。用于肝肾不足，腰膝酸软，阳痿遗精，遗尿尿频，肾虚胎漏，胎动不安，目昏耳鸣，脾肾虚泻。

　　[0003]菟丝子总黄酮是菟丝子药材主要活性成分，含量约为3.0%。主要的黄酮类化合物有山奈酚、槲皮素、金丝桃苷、紫云英苷等，其中金丝桃苷含量高低是《中国药典》2010年版一部所收载的评价菟丝子药材质量优劣的重要指标之一。因此，提高菟丝子配方颗粒总黄酮和金丝桃苷含量，是提高菟丝子配方颗粒的内在质量的重要手段。

　　[0004]中药配方颗粒，是在中医药理论指导下，对中药饮片经过各种工艺加工而成用于临床中医处方调配菟丝子提取物使用的颗粒剂。目前中药配方颗粒的药材提取为水提取，或者提取挥发油后水提取，但是，由于药材组织结构不同，不同生产厂家所采用水提取的方法不同，最终导致产品质量不一致， 药效存在差别。 [0005]而目前，菟丝子配方颗粒的制备工艺是采用传统工艺水提而制成的，由于菟丝子加水后种皮表面会产生大量粘性物质，在工业化提取时会阻碍有效成分的溶出，导致每克菟丝子配方颗粒中金丝桃苷含量较低。

　　【发明内容】

　　[0006]基于此，本发明的目的在于提供一种菟丝子提取物及其制备方法和菟丝子配方颗粒。

　　[0007]解决上述技术问题的具体技术方案如下:

　　[0008]一种菟丝子提取物的制备方法，包括如下步骤:

　　[0009](I)酶解、提取

　　[0010]取菟丝子，加入用冰乙酸调节pH为3-4的水，并按菟丝子的质量，加入

　　0.5wt%-l.5wt%的纤维素酶和/或果胶酶进行酶解；再加水进行提取，过滤，得滤液；所述酶解的温度为45-55°C，时间为l_3h ；

　　[0011](2)浓缩、干燥

　　[0012]将步骤⑴所得的滤液减压浓缩至清膏，干燥，即可。

　　[0013]在其中一些实施例中，步骤⑴中所述纤维素酶或果胶酶的添加量为lwt%-l.5wt%。

　　[0014]在其中一些实施例中，步骤(1)中所述纤维素酶的活力值为10000U/g，果胶酶的活力值为30000U/g。[0015]在其中一些实施例中，步骤⑴中所述纤维素酶和果胶酶的质量比为1:0.9-1.1。

　　[0016]在其中一些实施例中，步骤(1)中所述酶解的温度为50_55°C。

　　[0017]在其中一些实施例中，步骤(1)中所述pH值为3-4的水的添加量为菟丝子的质量

　　2-4 倍。

　　[0018]在其中一些实施例中，步骤(1)中所述提取为:加水提取2-3次，每次按菟丝子的质量加入8-10倍量的水。

　　[0019]在其中一些实施例中，步骤(2)中所述清膏在55_65°C时相对密度为1.05-1.10。

　　[0020]在其中一些实施例中，步骤(2)中所述干燥为喷雾干燥。

　　[0021]在其中一些实施例中，步骤(1)喷雾干燥的进风温度为185-195?，出风温度为75-85。。。

　　[0022]上述的方法制得的菟丝子提取物及一种菟丝子配方颗粒。

　　[0023]在其中一些实施例中，所述菟丝子提取物中金丝桃苷的含量为8.43-10.53mg/g,总黄酮的含量为75.69-98.10mg/g。

　　[0024]在其中一些实 施例中，所述菟丝子配方颗粒的有效成分为菟丝子提取物。

　　[0025]在其中一些实施例中，所述菟丝子配方颗粒成品中金丝桃苷的含量为

　　7.52-9.57mg/g，总黄酮的含量为 67.58-89.18mg/g。

　　[0026]本发明所述一种菟丝子提取物及其制备方法和菟丝子配方颗粒具有以下优点和有益效果:

　　[0027菟丝子提取物]本发明所述制备方法，经发明人的大量实验和研究，得出采用酶解技术破坏菟丝子种皮结构，降低菟丝子因加水后种皮表面产生的粘性，并确定了酶的种类和添加量、及酶解和提取过程中的最佳参数，使得金丝桃苷和总黄酮的提取率得到显著提高，其中金丝桃苷的含量提高了 30%以上，进而解决了菟丝子有效成分提取率偏低的问题。该方法简单易操作，且适合大规模生产。

　　【具体实施方式】

　　[0028]以下将结合具体实施例对本发明做进一步说明。

　　[0029]本发明所述纤维素酶的活力值为10000U/g，果胶酶的活力值为30000U/g。

　　[0030]本发明所述金丝桃苷和总黄酮含量测定方法如下:

　　[0031](I)金丝桃苷含量测定

　　[0032]取菟丝子提取物或菟丝子配方颗粒0.1-0.14g，精密称定，置50ml量瓶中，照《中国药典》2010年版一部菟丝子项下含量测定法测定。

　　[0033](2)总黄酮含量测定

　　[0034]取芦丁对照品50mg，精密称定，置25ml量瓶中，加70%乙醇适量，置水浴上微热使溶解，放冷，加70%乙醇至刻度，摇匀。精密量取7ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得每I ml中含芦丁 0.14mg的对照品溶液。精密量取对照品lml、2ml、3ml、4ml与5ml，分别置IOml量瓶中，各加水至5ml，加5%亚硝酸钠溶液0.6ml，混匀，放置6分钟，加10%硝酸铝溶液0.6ml，摇匀，放置6分钟，加4%氢氧化钠试液3.0ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法(《中国药典》2010年版附录V A)，在510nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。[0035]另取菟丝子提取物或菟丝子配方颗粒0.1-0.14g，精密称定，置50ml量瓶中，加25ml蒸馏水，超声处理(功率500W，频率40kHz)，放冷，加蒸馏水至刻度，摇匀，加5%亚硝酸钠溶液3.0ml，混匀，放置6分钟，加10%硝酸铝溶液3.0ml，摇匀，放置6分钟，加4%氢氧化钠试液15.0ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含总黄酮的重量(μ g)，计算，即得。

　　[0036]实施例1

　　[0037]本实施中菟丝子提取物的制备方法，具体如下:

　　[0038]取菟丝子药材lOOOg，依次加入3000ml用冰乙酸调节pH值至3.5的水和IOg纤维素酶，加热至50°C并保温酶解2小时，再加水提取二次，第一次加入药材质量10倍体积的水，提取2小时，第二次加入药材质量8倍体积的水，提取1.5小时，滤过，提取液减压浓缩至相对密度1.05~1.10 (60°C)，喷雾干燥(进风温度:185-195°C，出风温度:75_85°C)，得干浸膏，即菟丝子提取物，经测定:每克提取物中金丝桃苷含量10.53mg,总黄酮的含量98.1Omg0

　　[0039]菟丝子配方颗粒的制备方法:取干浸膏，加入适量麦芽糊精，混合均匀，干式制粒(具体参照传统菟丝子颗粒的制备方法)，按每袋相当于生药质量10克菟丝子药材分装，即得菟丝子配方颗粒。每克成品含金丝桃苷为9.57mg，含总黄酮为89.18mg。

　　[0040]实施例2

　　[0041]本实施中菟丝子提取物的制备方法，具体如下:

　　[0042]取英丝子药材1000g,依次加入2000ml用冰乙酸调节pH值至3的水和5g纤维素酶，加热至45°C并保温酶解3小时，再加水提取二次，第一次加入药材质量10倍体积的水，提取2小时，第二次加入药材质量8倍体积的水，提取1.5小时，滤过，提取液减压浓缩至相对密度1.05~1.10 (60°C),喷雾干燥(进风温度:185~195°C，出风温度:75~85°C)，得干浸膏，即菟丝子提取物，经测定:每克提取物中金丝桃苷含量8.43mg,总黄酮的含量75.69mg0

　　[0043]菟丝子配方颗粒的制备方法:取干浸膏，加入适量麦芽糊精，混合均匀，干式制粒(具体参照传统菟丝子颗粒的制备方法)，按每袋相当于生药质量10克菟丝子药材分装，即得菟丝子配方颗粒。每克成品含金丝桃苷为7.52mg，含总黄酮为67.58mg。

　　[0044]实施例3

　　[0045]本实施中菟丝子提取物的制备方法，具体如下:

　　[0046]取英丝子药材1000g,依次加入4000ml用冰乙酸调节pH值至4的水和15g纤维素酶，加热至55°C并保温酶解I小时，再加水提取2次，第一次加入药材质量10倍体积的水，提取2小时，第二次加入药材质量8倍体积的水，提取1.5小时，滤过，提取液减压浓缩至相对密度1.05~1.10 (60°C),喷雾干燥(进风温度:185~195°C，出风温度:75~85°C)，得干浸膏，即菟丝子提取物，经测定:每克提取物中金丝桃苷含量10.04mg，总黄酮的含量93.73mg0

　　[0047]菟丝子配方颗粒 的制备方法:取干浸膏，加入适量麦芽糊精，混合均匀，干式制粒(具体参照传统菟丝子颗粒的制备方法)，按每袋相当于生药量10克菟丝子药材分装，即得菟丝子配方颗粒。每克成品含金丝桃苷为8.97mg，含总黄酮为83.89mg。

　　[0048]实施例4[0049]本实施中菟丝子提取物的制备方法，具体如下:

　　[0050]取菟丝子药材lOOOg，依次加入3000ml用冰乙酸调节pH值至3.5的水和IOg果胶酶，加热至50°C并保温酶解2小时，加水提取二次，第一次加入药材质量10倍体积的水，提取2小时，第二次加入药材质量8倍体积的水，提取1.5小时，滤过，提取液减压浓缩至相对密度1.05~1.10 (60°C),喷雾干燥(进风温度:185~195°C，出风温度:75~85°C)，得干浸膏，即菟丝子提取物，经测定:每克提取物中金丝桃苷含量10.49mg,总黄酮的含量80.53mg0

　　[0051]菟丝子配方颗粒的制备方法:取干浸膏，加入适量麦芽糊精，混合均匀，干式制粒(具体参照传统菟丝子颗粒的制备方法)，按每袋相当于生药量10克菟丝子药材分装，即得英丝子配方颗粒。每克成品含金丝桃苷为9.36mg,含总黄酮为71.90mg。

　　[0052]实施例5

　　[0053]本实施中菟丝子提取物的制备方法，具体如下:

　　[0054]取英丝子药材1000g,依次加入2000ml用冰乙酸调节pH值至3的水和5g果胶酶，加热至45°C并保温酶解3小时，加水提取二次，第一次加入药材质量10倍质量的水，提取2小时，第二次加入药材质量8倍体积的水，提取1.5小时，滤过，提取液减压浓缩至相对密度1.05~1.10(60°C)，喷雾干燥(进风温度:185~195°C，出风温度:75~85°C )，得干浸膏，即菟丝子提取物，经测定:每克提取物中金丝桃苷含量9.82mg,总黄酮的含量80.17mg。

　　[0055]菟丝子配方颗粒的制备方法:取干浸膏，加入适量麦芽糊精，混合均匀，干式制粒(具体参照传统菟丝子颗 粒的制备方法)，按每袋相当于生药量10克菟丝子药材分装，即得英丝子配方颗粒。每克成品含金丝桃苷为8.77mg,含总黄酮为71.58mg。

　　[0056]实施例6

　　[0057]本实施中菟丝子提取物的制备方法，具体如下:

　　[0058]取英丝子药材1000g,依次加入4000ml用冰乙酸调节pH值至4的水和15g果胶酶，加热至55°C并保温酶解I小时，加水提取二次，第一次加入药材质量10倍质量的水，提取2小时，第二次加入药材质量8倍体积的水，提取1.5小时，滤过，提取液减压浓缩至相对密度

　　1.05~1.10(60°C)，喷雾干燥(进风温度:185~195°C，出风温度:75~85°C )，得干浸膏，即菟丝子提取物，经测定:每克提取物中金丝桃苷含量10.0Omg,总黄酮的含量81.60mg。

　　[0059]菟丝子配方颗粒的制备方法:取干浸膏，加入适量麦芽糊精，混合均匀，干式制粒(具体参照传统菟丝子颗粒的制备方法)，按每袋相当于生药量10克菟丝子药材分装，即得英丝子配方颗粒。每克成品含金丝桃苷为8.93mg,含总黄酮为72.86mg。

　　[0060]实施例7

　　[0061]本实施中菟丝子提取物的制备方法，具体如下:

　　[0062]取英丝子药材1000g,依次加入2000ml用冰乙酸调节pH值至4的水、5g果胶酶和5g纤维素酶，加热至55°C并保温酶解I小时，加水提取两次，第一次加入药材质量10倍质量的水，提取2小时，第二次加入药材质量8倍体积的水，提取1.5小时，滤过，提取液减压浓缩至相对密度1.05~1.10 (60°C)，喷雾干燥(进风温度:185-195°C，出风温度:75-85°C)，得干浸膏，即菟丝子提取物，经测定:每克提取物中金丝桃苷含量10.49mg，总黄酮的含量83.15mg。

　　[0063]菟丝子配方颗粒的制备方法:取干浸膏，加入适量麦芽糊精，混合均匀，干式制粒(具体参照传统菟丝子颗粒的制备方法)，按每袋相当于生药量10克菟丝子药材分装，即得菟丝子配方颗粒。每克成品含金丝桃苷为9.37mg，含总黄酮为74.24mg。

　　[0064]对比例I—传统菟丝子提取方法及提取量

　　[0065]本对比例传统菟丝子颗粒的制备方法，具体如下:

　　[0066]菟丝子药材加水提取二次，第一次加入药材质量10倍体积的水，提取2小时，第二次加入药材质量8倍体积的水，提取1.5小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩、干燥(得提取物)，加入适量麦芽糊精，混合均匀，干式制粒、分装工序，制成菟丝子配方颗粒。经测定:每克提取物中金丝桃苷含量6.40mg,总黄酮的含量69.32mg ;每克菟丝子配方颗粒中金丝桃苷含量仅5.7Img,总黄酮的含量61.89mg。

　　[0067]对比例2

　　[0068]本对比例菟丝子提取物的制备方法，具体如下:

　　[0069]取英丝子药材1000g,依次加入2000ml用冰乙酸调节pH值至5的水、4g果胶酶，加热至40°C并保温酶解50min，加水提取两次，第一次加入药材质量10倍质量的水，提取2小时，第二次加入药材质量8倍体积的水，提取1.5小时，滤过，提取液减压浓缩至相对密度1.05- 1.10(60°C)，喷雾干燥(进风温度:185-195°C，出风温度:75_85°C )，得干浸膏，即菟丝子提取物，经测定:每克提取物中金丝桃苷含量6.79mg,总黄酮的含量70.28mg。

　　[0070]对比例3

　　[0071]本对比例菟丝子提取物的制备方法，具体如下:

　　[0072]取英丝子药材1000g,依次加入2000ml用冰乙酸调节pH值至2.5的水、17g纤维素酶，加热至57°C并保温酶解3.5小时，加水提取两次，第一次加入药材质量10倍质量的水，提取2小时，第二次加入药材质量8倍体积的水，提取1.5小时，滤过，提取液减压浓缩至相对密度1.05~1.10 (60°C)，喷雾干燥(进风温度:185-195°C，出风温度:75_85°C )，得干浸膏，即菟丝子提取物，经测定:每克提取物中金丝桃苷含量7.33mg，总黄酮的含量71.90mg。

　　[0073]对比例4

　　[0074]本对比例菟丝子提取物的制备方法，具体如下:

　　[0075]取英丝子药材1000g,依次加入2000ml用冰乙酸调节pH值至4的水、2g果胶酶和2g纤维素酶，加热至40°C并保温酶解I小时，加水提取两次，第一次加入药材质量10倍质量的水，提取2小时，第二次加入药材质量8倍体积的水，提取1.5小时，滤过，提取液减压浓缩至相对密度 1.05~1.10 (60°C)，喷雾干燥(进风温度:185-195°C，出风温度:75-850C )，得干浸膏，即菟丝子提取物，经测定:每克提取物中金丝桃苷含量6.66mg,总黄酮的含量71.03mg。

　　[0076]以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

　　【权利要求】

　　1.一种菟丝子提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤: (1)酶解、提取 取菟丝子，加入用冰乙酸调节PH值为3-4的水，并按菟丝子的质量，加入0.5wt%-l.5wt%的纤维素酶和/或果胶酶进行酶解，再加水提取，过滤，得滤液；所述酶解的温度为45-55°C，时间为l-3h ； (2)浓缩、干燥 将步骤(1)所得的滤液减压浓缩至清膏，干燥，即可。

　　2.根据权利要求1所述的菟丝子提取物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述纤维素酶和/或果胶酶的添加量为lwt%-l.5wt%。

　　3.根据权利要求1或2所述的菟丝子提取物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述纤维素酶和果胶酶的质量比为1:0.9-1.1。

　　4.根据权利要求1所述的菟丝子提取物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述酶解的温度为50-55°C。

　　5.根据权利要求1所述的菟丝子提取物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述pH值为3-4的水的添加量为菟丝子质量的2-4倍。

　　6.根据权利要求1所述的菟丝子提取物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述提取为:加水提取2-3次，每次按菟丝子的质量加入8-10倍量的水。

　　7.根据权利要求1所述的菟丝子提取物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述清膏在55-65°C时相对密度为1.05-1.10。

　　8.根据权利要求1所述的菟丝子提取物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述干燥为喷雾干燥，所述喷雾干燥的进风温度为185-195°C，出风温度为75-85°C。

　　9.一种如权利要求1-8任一项所述的方法制得的菟丝子提取物。

　　10.一种菟丝子配方颗粒，其特征在于，所述菟丝子配方颗粒的有效成分为如权利要求9所述的菟丝子提取物。

　　【文档编号】A61K131/00GK103933104SQ201410120975

　　【公开日】2014年7月23日 申请日期:2014年3月27日 优先权日:2014年3月27日

　　【发明者】涂瑶生, 王洛临, 孙冬梅, 施之琪, 李智勇, 徐文杰, 陈雪婷, 周蓉, 谢媛, 陈朋 申请人:广东省第二中医院